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RAPD技术
发布时间:2022-08-19浏览次数:3133
一.RAPD技术简介
运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(RandomamplifiedpolymorphicDNA,随机扩增的多态性DNA)。尽管RAPD技术诞生的时间很短,但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及快速、简便的特点,使这个技术已渗透于基因组研究的各个方面。
RAPD技术建立于PCR技术基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为10聚体)为引物,对所研究基因组DNA进行PCR扩增。聚丙烯酰胺或琼脂糖电泳分离,经EB染色或放射性自显影来检测扩增产物DNA片段的多态性,这些扩增产物DNA片段的多态性反映了基因组相应区域的DNA多态性。
二.RAPD技术流程:
三.客户提供:
★ 基因组DNA:
●至少15μL样品,浓度为50-100ng/μL;
●2%琼脂糖电泳检测有DNA主带,没有降解;
●DNA经过DNA纯化试剂盒或磁珠纯化;
●DNA需溶解在TE或灭菌的去离子水里;
●DNA溶解后,肉眼看不到杂色;
★ 植物材料: 新鲜组织,叶片采用硅胶干燥后或干冰运输;
★ 动物材料: 新鲜组织,无水乙醇封存低温运输;